韩晓光    田 伟    刘 波    刘亚军    徐云峰    靳培浩

 【摘要】 目的：研究经蛛网膜下腔给予表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）对大鼠脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）后神经功能恢复的影响及其作用机制。方法：成年雌性SD大鼠40只，随机分为4组，每组10只，假手术组（A组）仅切除椎板；对照组（B组）SCI后，蛛网膜下腔注射同体积载体溶液；10mg/kg EGCG治疗组（C组）SCI后经蛛网膜下腔注射EGCG 10mg/kg；20mg/kg EGCG治疗组（D组）SCI后经蛛网膜下腔注射EGCG 20mg/kg。改良Allen法（40g·cm）制作T10节段SCI模型，L4水平蛛网膜下腔注射EGCG或载体溶液。术前、术后1d、术后3d及术后1、2、3、4周进行盲法BBB评分、斜板试验；术后4周时处死大鼠，病理学检查（Luxol fast blue染色）观察脊髓损伤部位残余髓鞘情况；免疫组化及Western blot法检测胶质细胞源性营养因子（GDNF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、Bcl-2和Bax的表达水平。结果：A组术前及术后各时间点BBB评分均为21分，斜板试验角度无明显变化；术后各时间点B、C组和D组BBB评分及斜板试验角度均小于A组（P＜0.05）；术后1d、3d时，B、C组和D组BBB评分以及斜板试验角度无统计学差异（P＞0.05）；术后1、2、3、4周时，C、D组的BBB评分及斜板试验角度均大于B组（P＜0.05），C组的BBB评分及斜板试验角度与D组比较均无统计学差异（P＞0.05）。术后4周时，B、C、D组大鼠脊髓损伤部位的髓鞘残余面积均小于A组（P＜0.05），C、D组明显大于B组（P＜0.05），在损伤脊髓中心D组明显大于C组（P＜0.05）。术后4周时免疫组化检查，B、C、D组的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的阳性表达强于A组，C、D组的BDNF、GDNF和Bcl-2的阳性表达强于B组，Bax的阳性表达弱于B组。术后4周时Western blot法检测，B、C、D组的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的表达高于A组（P＜0.05）；C、D组的BDNF和GDNF表达明显高于B组（P＜0.05），C组与D组无统计学差异（P＞0.05）；C、D组的Bcl-2表达明显高于B组（P＜0.05），C组与D组比较无统计学差异（P＞0.05）；C组和D组的Bax表达明显低于B组（P＜0.05），D组明显低于C组（P＜0.05）。结论：EGCG可有效促进大鼠SCI后的神经功能恢复，其机理可能与髓鞘的丢失减少、神经营养因子BDNF和GDNF的表达上调及细胞凋亡被抑制等有关。