目的 探讨外源性一氧化氮(NO)对表皮干细胞粘附和迁移功能的影响。
    方法 采用桇型胶原快速黏附法富集分离培养人表皮干细胞,免疫荧光细胞化学染色观察表皮干细胞标志物β1 整合素和角蛋白19 (K19)的表达。应用不同浓度NO 供体SNAP (0μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、500μmol/L),通过体外创伤模型、Transwell及体外粘附实验检测SNAP对表皮干细胞迁移及粘附功能的影响。
    结果 运用桇型胶原快速黏附法可以实现人成体表皮干细胞的快速分离和培养,免疫荧光细胞化学染色β1整合素、角蛋白19均呈强阳性表达。细胞迁移实验发现,100μmol/L的SNAP处理细胞24小时后能显著促进表皮干细胞的迁移:体外创伤模型中100μmol/L的SNAP处理细胞24小时后迁移率由对照组的52.3%增至64.7% (P<0.05):Transwell实验中100μmol/L的SNAP处理组与对照组相比转膜细胞数显著增多(P<0.05)。粘附实验发现,SNAP浓度越高对表皮干细胞粘附功能的抑制作用越强(P<0.05),呈明显的剂量效应关系。
    结论 适宜浓度的外源性NO 对体外培养人表皮干细胞的迁移功能有促进作用;外源性NO 对细胞的粘附功能有抑制作用。