李稚君 马信龙 付鑫 马剑雄 张华峰 孙晓雷 李鸿雁 赵秀宝

摘要  目的 探讨蛋白激酶Cξ(protein kinases Cξ, PKCξ)蛋白通路参与响应调控周期性牵张应 力促进成骨细胞增殖的相关机制。 方法无菌环境下, 组织分离法培养SD大鼠成骨细胞, 应用BioDynamic 细胞应力加载系统对第三代大鼠成骨细胞进行单轴周期性牵张应力加载, 形变量为2%, 加载频 率为0.25 Hz, 单轴向周期性牵张应力180 min(即实验组);应用同样的方法加载以PKCξ特异性经典抑 制剂Myristoylate 预处理的成骨细胞(即经典抑制剂组);使用同样的培养加载方式形变量为0%单轴向 周期性牵张应力180 min(即静态对照组)。应用流式细胞术检测大鼠成骨细胞的细胞周期表达, 并使用 免疫印迹法(Western blotting)、免疫荧光法分别检测实验组、经典抑制剂组和静态对照组大鼠成骨细胞 内转导蛋白通路PKCξ与磷酸化PKCξ(p-PKCξ)的表达。 结果 与静态对照组、经典抑制剂组相比, 单 轴向周期性牵张应力可以使大鼠成骨细胞S 期显著前移, 并显著上调大鼠成骨细胞转导蛋白通路PKCξ 与p-PKCξ的表达;同时, 抑制剂可以明显抑制p-PKCξ活化, 从而抑制PKCξ的表达。 结论 成骨细胞 PKCξ蛋白通路参与感知周期性牵张应力刺激, 并调控促进大鼠成骨细胞增殖, 是力学信号传导通路中 重要的环节。