马凯歌  邵增务  王佰川  张彦男  杨述华  刘涛

目的 为研究椎间盘组织工程种子细胞，观察脊索细胞培养基对BMSCs 增殖分化的影响。方法 取4 周龄日本大耳白兔胸腰段椎间盘分离培养脊索细胞，取双侧股骨分离培养BMSCs，用含15%FBS 的DMEM/F12 培养基培养脊索细胞，5 d 后制备脊索细胞培养基。实验分为两组，实验组BMSCs 中加入脊索细胞培养基培养，对照组BMSCs 中加入含15%FBS 的DMEM/F12 培养基培养。使用细胞活力细胞毒性检测检测细胞增殖情况，采用免疫荧光及实时荧光定量PCR 检测BMSCs 蛋白多糖及Ⅱ型胶原表达情况。 结果 成功分离脊索细胞及BMSCs。细胞增殖检测示，培养5、7、9、14 d，实验组细胞数量明显多于对照组（P < 0.05）。免疫荧光检测示对照组培养7、14 d 细胞内均无或者有较少Ⅱ型胶原及蛋白多糖表达，实验组二者均有较多表达，且培养14 d 时表达明显多于7 d。实时荧光定量PCR 检测示，培养7、14 d 实验组蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA 表达均显著高于对照组（P < 0.05）；实验组14 d 蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA 表达显著高于7 d（P < 0.05）。 结论 脊索细胞培养基可促进BMSCs 增殖，并诱导BMSCs 向类软骨细胞分化，为脊索细胞和BMSCs 作为种子细胞治疗椎间盘退变提供了依据。