俞超    杨飞   戴尅戎    张晓玲   唐坚  朱振安

摘要： 目的 探讨周期性张应变诱导体外培养的膝关节骨关节炎（osteoarthritis, OA）患者软骨细胞发生凋亡过程中的活性氧(reactive oxygen species, ROS)的作用机制。方法 对受力组软骨细胞施加频率0.5 Hz、强度20％延伸率的周期性张应变。对照组细胞的培养条件与受力组细胞一致，但不受力。N-乙酰半胱氨酸(NAC)和丁胱亚磺酰亚胺（BSO）干预组的软骨细胞在受力前分别使用NAC和BSO进行预处理。流式细胞术检测细胞凋亡率，DCFH-DA为荧光探针检测细胞内ROS含量，分光光度法检测软骨细胞内caspase-9活性变化。结果 0.5 Hz、20％延伸率的周期性张应变可以刺激软骨细胞内ROS、caspase-9活性及细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。使用NAC和BSO抑制及升高细胞内ROS含量后，可以明显抑制及促进周期性张应变诱导的软骨细胞的caspase-9活性及细胞凋亡率(P<0.05)。结论 周期性张应变通过促进ROS生成，进而激活caspase-9介导膝关节OA患者软骨细胞发生凋亡。抑制ROS的生成可以减轻周期性张应变导致的软骨细胞凋亡。