周慧芳      史念珂      雪原     杨忠       张超      王硕

摘要： 目的 探讨淫羊藿甙对骨形态发生蛋白细胞信号通路Smad1、Smad5和Smad4表达的调节作用及促进成骨细胞增殖与分化的机制.方法 在体外分别用含淫羊藿甙0、10-9、10-8和10-7 mol/L 的条件培养液干预MC3T3-E1细胞.给药后第1天、2天和3天,分别应用四甲基噻唑蓝法绘制细胞生长曲线并计算细胞群体倍增时间,用速率分光光度法测定碱性磷酸酶含量,用RT-PCR和Western blot 技术检测Smad1、Smad5、Smad4及骨钙素、Runx2、骨形态发生蛋白-2、骨保护素mRNA的表达,于细胞生长的第21天观察钙结节数量.结果 淫羊藿甙含量为10-8 mol/L时,MC3T3-E1细胞增殖能力最强,碱性磷酸酶活性和钙结节数量明显增加；淫羊藿甙作用细胞第1天、2天和3天时,10-8 mol/L组细胞Smad1、Smad5和Smad4 mRNA的表达量始终保持较高水平,第3天时10-9 mol/L和10-7 mol/L组表达明显减少；第2天时,10-8 mol/L组细胞Runx2、骨形态发生蛋白-2、骨保护素mRNA和骨钙素、Smadl、Smad5和Smad4蛋白表达明显增加.结论 淫羊藿甙通过直接刺激MC3T3-El细胞的骨形态发生蛋白-2、Runx2、Smadl、Smad5和Smad4的表达,且以表达水平同步增高的方式促进其成骨性分化.