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脊索细胞的体外培养及生物学特点的观察

2013-09-11 文章来源:华中科技大学同济医学院协和医院骨科 邵增务   我要说

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摘要目的  建立体外兔椎间盘脊索细胞的藻酸盐凝胶培养模型,并观察其形态及生物学特点。 方法 胶原酶消化法及不连续密度梯度离心法体外分离收集原代椎间盘脊索细胞,于1.2% 低粘度藻酸盐凝胶中进行培养。倒置相差显微镜下观察细胞形态、Ⅱ型胶原免疫荧光染色进行细胞表型初步鉴定,并分别以死活细胞染色及活细胞计数试剂盒(CCK-8法)检测细胞在藻酸盐凝胶中的存活情况及细胞增殖能力。结果 成功分离获得原代椎间盘脊索细胞,其可稳定表达Ⅱ型胶原。原代细胞在藻酸盐凝胶中生长良好,但增殖缓慢。

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